表达肾癌G250基因和hGM-CSF基因HEK293细胞系的建立

• 作者: 刘鑫 叶秋萍 宫君原 李淑琴 陈怡
• 来源期刊: 岭南现代临床外科
• 学科: 医学
• 关键词: 肾细胞癌 G250 hGM-CSF G418抗性 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 270-273
• 分类号: R737.11
• 字数: 3424字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-976X.2011.04.013

摘要

目的 建立稳定表达肾癌G250基因与基因佐剂hGM-CSF基因编码蛋白的的HEK293细胞系.方法 通过脂质体转染的方法,将表达肾癌G250基因与细胞因子GM-CSF基因的双顺反子pIG250-GM真核表达质粒导入HEK293细胞中;经持续G418压力选择和有限稀释法获得稳定转染的细胞系;用免疫组化、ELISA和Western Blot方法,检测目的 蛋白在HEK293细胞中的表达.结果 经600 μg/mL的G418压力筛选后,获得了抗性细胞克隆;免疫组织化学方法检测到表达G250的阳性细胞；ELISA方法检测到pIG250-GM转染组细胞培养上清中hGM-CSF的表达与空载体对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；Western Blotting方法检测到G250蛋白的表达,分子量约54Ku,与预期大小相符.结论 成功建立可稳定表达肾癌G250基因与细胞因子GM-CSF基因的HEK293细胞系,为研究防治肾癌疫苗的免疫应答机制提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宫君原	暨南大学医学院	5	1	1.0	1.0
2	刘鑫	暨南大学医学院	9	2	1.0	1.0
3	叶秋萍	暨南大学医学院	3	1	1.0	1.0
4	陈怡	中山大学孙逸仙纪念医院外科	11	38	3.0	6.0
5	李淑琴	中山大学孙逸仙纪念医院外科	1	0	0.0	0.0