稳定过表达人SIRT1基因的HEK293细胞系的建立

• 作者: 任峰 张凯帆 张建丰 杨莉娜 林琴琴 林蓉 王维蓉
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 心血管疾病 SIRT1 稳定过表达 HEK293细胞
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 临床新进展
• 页码范围: 18-20
• 页数: 3页
• 字数: 2208字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2013.01.010

摘要

目的:构建人沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)基因的真核表达载体,建立稳定过表达人SIRT1的HEK293细胞系.方法:将含有SIRT1的克隆载体pCRⅡ-TOPO-SIRT1双酶切后,连接至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,连接产物经酶切鉴定后进行测序.构建的重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-SIRT1转染HEK293细胞.G418进行筛选.Real-time PCR和Western Blot分别从mRNA和蛋白水平检测SIRTI的表达.结果:酶切分析和测序结果证实,SIRT1基因成功插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中.Real-time PCR和Western Blot结果显示稳定转染pc:DNA3.1(+)-SIRT1的HEK293细胞SIRT1的表达水平明显高于未转染细胞(P<0.01).结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(+)-SIRT1,并建立了稳定过表达SIRT1基因的HEK293细胞系.为进-步研究SIRT1基因在心血管疾病中的作用及其机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林蓉	西安交通大学医学院药理系	50	456	11.0	20.0
2	王维蓉	西安交通大学医学院药理系	12	129	3.0	11.0
3	任峰	西安交通大学医学院药理系	14	409	9.0	14.0
4	林琴琴	西安交通大学医学院药理系	3	4	2.0	2.0
5	张建丰	西安交通大学医学院药理系	2	2	1.0	1.0
6	张凯帆	西安交通大学医学院药理系	1	2	1.0	1.0
7	杨莉娜	西安交通大学医学院药理系	1	2	1.0	1.0