稳定表达人水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4的建立及应用

• 作者: 丰岩清 刘俊秀 孙巧松 曾缨 赖蓉 陈曦 黄帆
• 来源期刊: 中山大学学报（医学科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 视神经脊髓炎 NMO-IgG 水通道蛋白4(AQP4) HEK293
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 786-791
• 分类号: R54
• 字数: 3682字
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立一种可临床应用的并能稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,用于检测视神经脊髓炎患者血清中的AQP4抗体.[方法]构建有AQP4基因的表达载体,利用脂质体将载体转入HEK293细胞,G418筛选,RT-PCR、间接免疫荧光检测稳定细胞系中水通道蛋白4的表达及分布.细胞间接免疫荧光检测20例NMO患者、20例MS患者、30例健康对照血清中的AQP4抗体,并同鼠脑间接免疫荧光检测法比较.[结果]限制性酶切消化、PCR、测序结果证明载体构建成功.间接免疫荧光证实稳定细胞系中有AQP4表达.且主要分布在细胞膜上.20例NMO患者血清中11例NMO-IgG阳性,18例AQP4抗体阳性,滴度在1:60-1:15 360之间,而MS患者仅检测到1例阳性,健康对照未检测到阳性.[结论]成功构建稳定表达水通道蛋白4的胚肾细胞系HEK293/AQP4,并检测出国人NMO患者血清中存在AQP4抗体,且敏感性高于鼠脑法,可以有效的鉴别视神经脊髓炎和多发性硬化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	丰岩清	中山大学附属第一医院神经科	36	116	6.0	8.0
2	曾缨	中山大学附属第一医院神经科	24	108	7.0	9.0
3	陈曦	中山大学附属第一医院神经科	82	366	11.0	15.0
4	黄帆	中山大学附属第一医院神经科	52	228	8.0	11.0
5	孙巧松	中山大学附属第一医院神经科	9	29	3.0	5.0
6	刘俊秀	中山大学附属第一医院神经科	10	32	3.0	5.0
7	赖蓉	中山大学附属第一医院神经科	10	85	4.0	9.0