高效液相排阻色谱技术在抗哇巴因多克隆抗体制备中的应用

• 作者: 吕卓人 张明娟 袁育康 贺浪冲
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高效液相排阻色谱法 多克隆 哇巴因 动物,实验
• 年，卷（期）: 2001,（12）
• 所属期刊栏目: 论著·临床报道
• 页码范围: 707-710
• 页数: 4页
• 分类号: R4
• 字数: 4459字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2001.12.001

摘要

目的:探讨高效液相排阻色谱技术(HPSEC)在抗哇巴因多克隆抗体的制备及纯化中应用的意义.方法:免疫新西兰大白兔制备出抗哇巴因多克隆抗体.在优化色谱条件下,应用HPSEC技术纯化抗哇巴因多克隆抗体.采用酶联免疫吸附法(ELISA)及考马斯亮兰法进行定性、定量分析,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度.分别选用三种标准蛋白.在优化的色谱条件下,分别测定标准蛋白的洗脱体积,并根据分子量的对数与洗脱体积绘制标准曲线.在相同的色谱条件下,测定抗哇巴因多克隆抗体的洗脱体积,从而测定分子量.结果:优化的色谱条件为流动相0.05mol/L的磷酸盐缓冲液,pH 6.0,流速0.30ml/min,进样量5μl.纯化后抗体效价1:50,蛋白浓度20μg/ml.纯化后抗体电泳图谱仅可见一条色谱带.在优化的色谱条件下,测得抗哇巴因多克隆抗体的分子量为166kD.结论:HPSEC是一种有效、快速纯化抗哇巴因多克隆抗体的方法,为日后制备高纯度、高活性的抗哇巴因多克隆抗体奠定基础.同时HPSEC也是测定分子量的有效方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺浪冲		121	1440	23.0	32.0
2	袁育康	西安交通大学医学院免疫学教研室	71	557	14.0	20.0
3	张明娟	西安交通大学第一医院心内科	49	240	7.0	13.0
4	吕卓人	西安交通大学第一医院心内科	114	1111	18.0	29.0