人气道上皮细胞内皮素转换酶-1反义RNA构建

• 作者: 任筱兰 徐军 文思成 钟南山
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮素转换酶核糖核酸反义载体构建
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 101-103
• 页数: 3页
• 分类号: R56
• 字数: 1932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2001.02.004

摘要

目的研究内皮素转换酶-1（ECE-1）反义RNA对人气道上皮细胞ECE-1表达的抑制作用。方法构建ECE-1反义RNA表达载体，用脂质体(FuGENG 6)转染人气道上皮细胞株（16HBE），G418筛选得到稳定表达反义ECE-1 RNA的细胞株（anti-16HBE）。RT-PCR检测转染细胞ECE-1 mRNA的表达，Western bloting检测细胞ECE蛋白表达情况。结果①经酶切及DNA测序鉴定证明，0.7kb的ECE-1 DNA片段反向连接到带有萤光蛋白基因为报告基因的pEGPC1表达载体；荧光倒置显微镜显示大量细胞分泌荧光蛋白并能反复传代稳定表达；② anti-16HBE细胞ECE mRNA基因表达(ECE/actin β 0.012 5±0.058)比16HBE细胞(ECE/actin β 0.134 7±0.067)明显低(P＜0.05)；而Wester bloting亦显示anti-16HBE细胞ECE表达量比16HBE细胞明显低。结论ECE反义RNA表达载体可抑制人气道上皮细胞ECE-1表达与分泌。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟南山		21	126	6.0	11.0
2	徐军		7	16	3.0	4.0
3	文思成		2	1	1.0	1.0
4	任筱兰		2	1	1.0	1.0