旋毛虫河南株TspE1基因克隆及多态性分析

• 作者: 崔晶 张荣光 王中全 王会智 赵国强
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 旋毛虫 成囊前期幼虫 反转录-聚合酶链式反应 克隆 DNA序列测定 遗传多态性 河南株
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 295-300
• 页数: 6页
• 分类号: R383.15
• 字数: 3259字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2002.03.009

摘要

目的:构建旋毛虫河南株成囊前期幼虫编码相对分子质量为31 000的蛋白抗原结构基因(TspE1)的重组质粒(pUC18-TspE1),测定TspE1基因序列,分析旋毛虫河南株的基因多态性.方法:根据TspE1基因已知序列设计合成一对引物,采用RT-PCR 技术获取旋毛虫成囊前期幼虫目的基因,PCR产物经纯化后用BamHI、HindⅢ进行双酶切,定向克隆入pUC18质粒,转化大肠杆菌JM109;重组质粒用BamHI+ HindⅢ酶切及PCR扩增鉴定.用Sanger双脱氧链终止法进行DNA序列测定,应用DNASIS软件进行同源性比较.结果:RT-PCR 扩增获得成囊前期幼虫TspE1基因 (871 bp), EcoR I 酶切鉴定正确;筛选出7个阳性克隆,对目的基因的测序结果显示旋毛虫河南株TspE1基因有5种类型,但都与GenBank中的TspE1基因序列及由其推测的氨基酸序列不完全相同.结论:应用RT-PCR 技术扩增出旋毛虫河南株成囊前期幼虫编码相对分子质量为31 000的抗原结构基因,证实TspE1 基因在成囊前期幼虫已有表达,结果还提示旋毛虫河南株可能存在有基因多态性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国强	郑州大学基础医学院微生物学与免疫学教研室	245	807	11.0	16.0