反转录病毒载体介导的人β-珠蛋白基因低水平表达的机制初探

• 作者: 刘德培 梁植权 祖振响 董文吉 郝德龙 郭志晨
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 医学
• 关键词: β-地中海贫血 基因治疗 反转录病毒载体 位置效应 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 763-768
• 页数: 6页
• 分类号: R37
• 语种: 英文

摘要

以人β-珠蛋白基因簇基因座控制区DNaseI高敏位点2和高敏位点3组合的微小基因座控制区作为调控元件, 以374 bp第二内含子部分缺失的2.0 kb β-珠蛋白基因作为结构基因的反转录病毒重组体, 通过建立ψ-2产病毒细胞系和瞬时转染双向性包装细胞系ψ-A两种方法获得重组病毒. 感染鼠红白血病细胞后, Southern杂交鉴定前病毒整合完整性, 用RNase保护实验检测人β-珠蛋白基因的表达, 通过PCR产物测序确定前病毒结构. 结果表明, 在瞬时转染ψ-A来源的重组病毒转导和质粒转染的鼠红白血病细胞中, 人β-珠蛋白基因的表达水平分别达到内源性鼠α-基因表达的(52.4±11.2)% (n=12)和 (73.8±14.3)% (n=12, 未确定整合拷贝数); 而在ψ-2产病毒细胞系来源的病毒转导的细胞中, 表达水平低于3%, 前病毒序列分析发现其高敏位点2中出现一个点突变, 这可能是人β-珠蛋白基因呈低水平表达的一个原因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘德培	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室	32	162	7.0	11.0
2	梁植权	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室	9	51	4.0	7.0
3	董文吉	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室	3	3	1.0	1.0
4	祖振响	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
5	郝德龙	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室	3	0	0.0	0.0
6	郭志晨	中国医学科学院基础医学研究所中国协和医科大学基础医学院医学分子生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0