菌体内可溶性表达重组THANK蛋白的免疫调节活性分析

• 作者: 吴东 吴孟超 沈锋
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人THANK基因 基因表达 生物学功能 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 603-607
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 3484字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2002.06.005

摘要

目的构建含有人THANK基因的表达载体,诱导其在大肠杆菌中可溶性表达,并对表达的THANK蛋白的免疫调节活性进行检测.方法从含有全长THANK cDNA的pMD18-THANK质粒中克隆THANK的胞外区片段,并将其亚克隆至原核表达载体pET-11a中,筛选阳性重组质粒pET-THANK,以IPTG诱导其可溶性表达,并以SDS-PAGE和Western blot检测进行分析.表达的蛋白初步纯化后,分析其对B、T细胞的免疫调节活性.结果PCR扩增出了THANK胞外区cDNA片段.SDS-PAGE和Western分析证实重组的pET-THANK质粒可表达出THANK蛋白.可溶性THANK重组蛋白可共刺激B、T细胞的增生,并可诱导活化T细胞的凋亡.结论本实验成功地将THANK胞外区片段在大肠杆菌中进行表达,表达的蛋白具有免疫调节活性.