猪囊尾蚴抗原cC1在巴斯德毕赤酵母中的表达

• 作者: 孙树汉 杨湘越 郭瀛军 陈蕊雯 颜宏利
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: cC1cDNA 克隆表达 巴斯德毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 31-33，67
• 页数: 4页
• 分类号: R383
• 字数: 4174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2002.03.009

摘要

目的克隆并在巴斯德毕赤酵母中表达猪囊尾蚴抗原cC1.方法用PCR法在cC1cDNA5′端引入所需限制酶位点和酵母分泌信号肽,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-cC1.采用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清SDS-PAGE和Western blot鉴定.结果 PCR产物经测序无误,pPIC9-cC1和pPIC9k-cC1酶切分析与预期相符,获取863个酵母阳性重组克隆及9个高拷贝转化子.表达产物cC1的分子量约42kDa,占分泌总蛋白80%以上,产物浓度为200-350mg/L.Western blot证实表达产物具有天然cC1分子的免疫原性.结论在巴斯德毕赤酵母中成功表达了猪囊尾蚴cC1抗原,为进一步研究打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙树汉	上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	3	29	2.0	3.0
2	颜宏利	上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	3	29	2.0	3.0
3	陈蕊雯	上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	2	27	2.0	2.0
4	杨湘越	上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	1	14	1.0	1.0
5	郭瀛军	上海第二军医大学基础医学部医学遗传学教研室	1	14	1.0	1.0