猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶TsCL-1基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: LUO Xue-nong YUE Cheng ZHENG Ya-dong 刘琼 才学鹏 潘晓梅 郭爱疆
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪囊尾蚴 半胱氨酸蛋白酶 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 680-684
• 页数: 5页
• 分类号: S852.734|Q786
• 字数: 4975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2008.08.008

摘要

采用RT-PCR方法从猪囊尾蚴总RNA中扩增出TsCL-1基因并构建了真核表达载体pPIC9K-TsCL-1,pPIC9K-TsCL-1电转化毕赤酵母GS115.采用G418抗性梯度筛选多拷贝重组菌株,经甲醇诱导表达,应用SDS-PAGE和Western-blot分析重组蛋白的表达情况.结果显示,TsCL-1与GenBank登录的TsCL的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.8%和100%,与肝片吸虫和大片吸虫组织蛋白酶氨基酸的同源性为76.3%.TsCL-1基因在毕赤酵母中成功表达,表达产物的分子质量为42 ku左右;Western-blot分析表明,表达产物具有反应原性.