枯草芽孢杆菌角蛋白酶kerC基因在毕赤酵母中的高效表达

• 作者: 唐自钟 王丽华 陈惠 韩学易
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 枯草芽孢杆菌 角蛋白酶 kerC基因 毕赤酵母 高效表达
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 262-266
• 页数: 5页
• 分类号: Q814
• 字数: 4075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201309053

摘要

以角蛋白酶基因为研究对象,构建毕赤酵母(Pichia pastoris)稳定的高效表达系统.采用PCR方法从枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)B-3中克隆得到角蛋白酶基因kerC,将其构建在毕赤酵母表达载体pPICZαA上,得到重组质粒pPICZαA-kerC,转入毕赤酵母X-33中,成功实现了角蛋白酶基因kerC在真核表达系统中的高效表达.重组菌株以体积分数1％的甲醇诱导培养108h后,酶活力可达32.31U/mL,提高了11.15倍.重组酶最适温度为60℃,最适pH值为7.5,反应体系中3mmol/L的Co2+、Fe2+和Ca2+能明显增强其酶活力.SDS-PAGE检测表明,重组酶分子质量约为31kD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈惠	四川农业大学生命科学与理学院	108	1021	19.0	26.0
2	王丽华	四川农业大学生命科学与理学院	10	124	6.0	10.0
3	韩学易	四川农业大学生命科学与理学院	20	154	6.0	12.0
4	唐自钟	四川农业大学生命科学与理学院	27	59	4.0	6.0