用限制性cDNA文库制作K562细胞基因表达谱芯片探针

• 作者: 吴清华 姚汝华 宋艳斌 李凌 祝骥 郑文岭 马文丽
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 限制性cDNA文库 K562细胞 基因表达谱芯片
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 142-146
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 4811字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2002.02.008

摘要

以人红白血病K562细胞为材料,应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建cDNA文库.该文库通过PCR引物3′端延伸两个不同碱基形成136对引物对cDNA进行限制性扩增, 得到136组不同的PCR扩增产物,纯化后与载体连接并转化细菌,即为限制性cDNA文库.根据不同的分组进行克隆的鉴定和分离,并进行大量扩增制备cDNA芯片探针.该方法构建的文库因经过了限制性分组扩增,每组均含有特定的cDNA,因而大大加快了随后克隆的分离和鉴定的速度,为基因芯片探针制备提供了一个新方法.