细菌脂多糖增加小鼠耳蜗核因子κB的DNA结合活性

• 作者: 伍伟景 谢鼎华
• 来源期刊: 中华耳鼻咽喉科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 耳蜗 转录因子 脂多糖类 DNA结合蛋白质类 核因子-κB
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R76
• 字数: 2945字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1673-0860.2002.01.006

摘要

目的 探讨鼓室内注射细菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)是否诱发小鼠耳蜗中转录因子核因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)的激活,建立耳蜗组织NF-κB激活的研究方法. 方法 CBA小鼠12只,分别鼓室内注射LPS(6只)或生理盐水(6只 ),3 h后取耳蜗进行核蛋白提取并定量,将核提取物与32P标记的NF-κB寡核苷酸探针进行结合,通过4.5%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离结合与游离探针,放射自显影分析,以检测耳蜗中核蛋白提取物与特异性NF-κB 探针的结合活性,并用NF-κB亚单位P65和P50抗体进行超滞后分析. 结果 LPS组NF-κB的DNA结合活性较生理盐水组明显增高.超滞后分析表明预先与P65和P50抗体反应的LPS组出现明显滞后电泳带,提示NF-κB激活与P65和P50亚单位有关. 结论鼓室内注射LPS可诱发耳蜗NF-κB激活,该方法可为进一步研究耳蜗NF-κB激活提供阳性动物模型.