通过T-A克隆技术构建含免疫刺激序列CpG基序的抗SBR DNA疫苗

• 作者: 刘贤锡 卞继峰 姜广水 李静 杨丕山 杨小青 耿昭
• 来源期刊: 北京口腔医学
• 学科: 医学
• 关键词: 龋病预防 DNA疫苗 CpG基序 T-A克隆
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 109-113
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2786字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-673X.2002.03.001

摘要

目的:构建含免疫刺激序列、能够阻止变形链球菌在牙面粘附的防龋DNA疫苗.方法:根据原核表达质粒pSBR-CTA2B基因序列,设计针对编码变形链球菌表面蛋白抗原AgⅠ/Ⅱ分子中唾液蛋白结合区段(SBR)的特异性PCR引物,利用PCR技术由质粒pSBR-CTA2B扩增目的DNA片断;通过T-A克隆技术将目的DNA片段克隆于中间载体pMD18-T,鉴定插入方向后,选择插入方向正确的克隆,将目的DNA从中间载体释放,再克隆至含有CpG免疫刺激序列的真核表达载体pcDNA3.1.结果:通过对重组质粒pcDNA3.1-SBR进行酶切图谱分析和DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pcDNA3.1-SBR构建成功、开放阅读框架正确.结论:利用T-A克隆等技术可成功将编码SBR的DNA片段克隆到含有免疫刺激序列CpG的真核表达载体pcDNA3.1的适当部位,构建出真核表达重组质粒pcDNA 3.1-SBR作为有效防龋的DNA疫苗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李静	山东大学口腔医学院	218	1773	24.0	35.0
2	杨丕山	山东大学口腔医学院	120	683	13.0	16.0
3	杨小青	山东大学口腔医学院	3	10	2.0	3.0