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HLA-C基因真核细胞表达载体的构建、鉴定及表达
HLA-C基因真核细胞表达载体的构建、鉴定及表达
作者:
李卫党
范丽安
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
HLA RT-PCR 基因克隆 基因表达
摘要:
目的:构建人白细胞抗原(RLA-C)基因真核细胞表达载体,在JAR细胞表面表达,并对其功能进行探讨.方法:用RT-PCR从人外周血淋巴细胞的总mRNA中逆转录扩增HLA-C的cDNA,克隆到PBluescript SD+/-噬菌粒中;测序鉴定后,定向亚克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中.经脂质体转染JAR细胞,G418筛选阳性克隆,FACS检测RLA-C分子的表达.转染HLA-C分子的JAR细胞再与分离的NK细胞进行细胞毒试验.结果:限制性内切酶酶切和序列分析表明,克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中的HLA-C等位基因是HLA-Cw*0602,该分子在JAR细胞株获得高效表达.直接分离的PBL细胞对JAR细胞以及表达HLA-C分子的JAR细胞无细胞毒作用;而IL-2活化的NK细胞对这些细胞都有细胞毒作用.结论:RLA-C基因的成功表达为研究HLA-C分子与NK细胞受体((KIR)之间的关系奠定了基础,NK细胞对JAR细胞的杀伤可能存在不依赖HLA-C分子的机制.
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文献信息
篇名
HLA-C基因真核细胞表达载体的构建、鉴定及表达
来源期刊
中国免疫学杂志
学科
医学
关键词
HLA RT-PCR 基因克隆 基因表达
年,卷(期)
2002,(11)
所属期刊栏目
遗传免疫学
研究方向
页码范围
772-775
页数
4页
分类号
R394
字数
3332字
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
范丽安
上海第二医科大学上海市免疫学研究所
43
284
10.0
14.0
2
李卫党
上海第二医科大学上海市免疫学研究所
4
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研究主题发展历程
节点文献
HLA RT-PCR 基因克隆 基因表达
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国免疫学杂志
主办单位:
中国免疫学会
吉林省医学期刊社
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-484X
CN:
22-1126/R
开本:
大16开
出版地:
长春市建政路971号
邮发代号:
12-89
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
7702
总下载数(次)
13
总被引数(次)
40225
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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