DAAO/D-Ala系统对高致瘤性K562e细胞体外杀伤效应及其机制的研究

• 作者: 周虹 张雨生 王健民 翟勇平 韩凤来
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: D-氨基酸氧化酶基因 基因表达 细胞系,K562
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 12-15
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 3057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-2727.2002.01.003

摘要

目的研究D-氨基酸氧化酶(DAAO)/D-丙氨酸(D-Ala)自杀基因系统在基因治疗中的应用.方法应用逆转录病毒转染技术获得稳定表达DAAO的高致瘤性K562e单克隆细胞KDfGC,用PCR、原位杂交技术对DAAO基因修饰的KDfGC细胞进行鉴定;通过细胞形态、活细胞计数观察细胞生物学特性;应用MTT法检测D-Ala对KDfGC、不同比例DAAO表达阳性与阴性混合细胞的杀伤作用;用酚红氧化法测定培养上清H2O2水平.结果 PCR和原位杂交分析证明DAAO基因已整合至细胞基因组中,并在mRNA水平表达.KDfGC与未转基因的原肿瘤细胞相比,生长速度差异无显著性.12.5 mmol/L D-Ala作用24 h即可杀死近90%的KDfGC细胞,而且D-Ala达到一定有效浓度杀伤效率可成倍提高.上清的H2O2产生水平与杀伤转基因细胞作用相一致.KDfGC与不同比例的K562e细胞混合时,被15.0 mmol/L D-Ala杀死的细胞比例不超过KDfGC细胞的比例.结论 DAAO/D-Ala系统可有效杀伤K652e白血病细胞,在该模型未观察到明显旁观者效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王健民	第二军医大学附属长海医院血液科	194	921	13.0	22.0
2	周虹	第二军医大学附属长海医院血液科	52	314	8.0	15.0
3	翟勇平	第二军医大学附属长海医院血液科	7	19	2.0	4.0
4	张雨生	第二军医大学附属长海医院血液科	9	28	3.0	5.0
5	韩凤来	第二军医大学附属长海医院血液科	8	43	5.0	6.0