重组人纤维连接蛋白对无血清培养的CIK细胞增殖及对K562细胞杀伤活性的影响

• 作者: 宋永平 张成娟 张旭华 徐本玲 范瑞华 袁龙 高全立
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 纤维连接蛋白 细胞因子诱导的杀伤性细胞 无血清培养 K562细胞
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 24-28
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8259.2012.01.006

摘要

目的 探讨重组人纤维连接蛋白(RetroNectin,RN)诱导的细胞因子诱导的杀伤细胞CIK增殖、免疫特性及对人类K562细胞杀伤活性的影响.方法 密度梯度分离法分离外周血单个核细胞后分成两组,应用CD3单抗、IFN-γ、IL- 2培养CIK细胞,一组含RN(RN组),一组不含RN(Non-RN组).记录两组细胞增殖速度；用流式细胞术动态测定免疫细胞表型；用CBA细胞因子试剂盒检测IFN-γ、TNF-α及IL-4的分泌；用CFSE/PI双标法测定CIK细胞对人红白血病细胞株(K562)的体外杀伤活性.结果 RN组细胞生长明显快于Non-RN组(P＜0.05)；CD3+CD8+的细胞随着时间的延长逐渐增多,但两组间比较无统计学差异；CD3+ CD56+细胞所占百分比在第5天和第10天时两组间比较均无统计学差异(P＞0.05),在第15天时RN组有大幅度升高,第15、20、25天两组比较均有统计学差异(P＜0.05).细胞毒杀伤活性结果显示,RN组与Non-RN组对K562细胞毒活性亦有统计学差异.两组间细胞因子IFN-γ、TNF-α随着培养时间的延长,分泌量逐渐升高.结论 使用RN诱导的CIK细胞增殖速度快,杀伤肿瘤细胞活性高,是一种安全高效的细胞培养方法.