抑肽酶基因的克隆和表达

• 作者: 吴梧桐 谭树华 高捷
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 抑肽酶 融合表达 复性
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 66-70
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 字数: 3715字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2002.02.002

摘要

抑肽酶作为天然的非特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂,临床用途广泛.为实现抑肽酶的大量制备,按大肠杆菌惯用密码子用人工方法合成抑肽酶结构基因,克隆于PUC18的EcoRⅠ和PstⅠ位点,转入Top10大肠杆菌(recA)中,经测序证明序列正确.表达体系模拟抑肽酶的体内成熟过程,将其自身的13肽pro序列融合于抑肽酶的N端,并在其间插入胰蛋白酶识别位点.该融合蛋白在使用PET-11C载体表达时,产物以包涵体形式存在于大肠杆菌中,表达量占菌体总蛋白的30%以上.复性实验证明:该肽段不影响抑肽酶的正确折叠,还能帮助抑肽酶包涵体进行体外折叠,提高复性得率.复性后使用胰蛋白酶切割融合蛋白,可得天然构象的活性抑肽酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴梧桐	中国药科大学生物制药学院	256	2771	24.0	37.0
2	高捷	中国药科大学生物制药学院	4	55	4.0	4.0
3	谭树华	中国药科大学生物制药学院	55	198	9.0	12.0