人脐血造血干/祖细胞体外定向诱导分化过程中端粒酶的表达

• 作者: 冯凯 初飞 南雪 张锐 王冬梅 白慈贤 袁红丰 裴雪涛 陈琳
• 来源期刊: 中国实验血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脐血 造血干/祖细胞 诱导分化 端粒酶
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 281-284
• 页数: 4页
• 分类号: R331.14
• 字数: 3108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-2137.2002.04.002

摘要

探讨脐血造血干/祖细胞体外诱导分化过程中端粒酶的表达,为造血干细胞产品的临床应用提供一个监测细胞增殖潜能和安全性的指标.用源自人脐血的CD34+细胞及不同细胞因子组合(SCF+IL-3+IL-6+G-CSF,SCF+IL-3+IL-6+EPO)在体外进行诱导分化;用TRAP聚丙烯酰胺凝胶电泳法、TRAP-ELISA法检测CD34+细胞及诱导分化细胞的端粒酶活性;用Western印迹法在蛋白水平检测端粒酶催化亚基hTERT的表达,用RT-PCR在细胞转录水平检测端粒酶催化亚基hTERT mRNA的表达.结果显示,在体外诱导分化14-21天为细胞生长峰值,细胞总数可增加(1006.4±103.2)倍,随着培养时间的延长,细胞数量不再增加.CD34+细胞低度表达端粒酶活性和hTERT基因,在细胞诱导分化过程中端粒酶活性及hTERT表达逐渐升高,细胞诱导14天后端粒酶活性及hTERT表达下降,28天端粒酶活性及hTERT基因检测不出.结论:利用CD34+细胞在体外定向诱导分化出的大量细胞,不具有无限增殖的特性,可安全地应用于临床,且利用端粒酶的检测可为临床应用诱导分化细胞的时机提供依据.