猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF6基因在毕赤酵母中的表达

• 作者: 仇华吉 吴丹 周艳君 王云峰 童光志 薛强 钱平 陈焕春
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 酵母表达系统 猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF6基因
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 161-164
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+9.6|Q786
• 字数: 3051字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2002.03.001

摘要

根据酵母表达系统的密码子偏爱性、poly(A)信号以及外源基因mRNA5'端的二级结构等特性,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF6基因进行简并改造和人工合成,然后以正确的读码框架插入到分泌型酵母高效表达载体pPICZαA的α因子信号肽编码序列3'端,构建成酵母转移载体,用化学方法转化受体酵母菌GS115,经PCR和酶切鉴定证实,目的基因已整合到重组酵母菌染色体中.对重组酵母进行诱导表达,并通过SDS-PAGE和Western blot分析进行筛选,获得了一株高效表达目的蛋白的重组酵母菌,该重组蛋白具有免疫学活性,其表达水平可达2.0g/L,而未经改造的ORF6基因则不表达.