615小鼠MHCⅠcDNA重组逆转录病毒基因治疗载体的构建和包装

• 作者: 彭文珍 李龙江 温玉明 王昌美 陈俊杰 龚浩
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 小鼠 MHCⅠ 转染 PA317细胞
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 404-407
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 2817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2002.06.004

摘要

目的:制备615小鼠MHCⅠ目的基因(H-2Kk)载体,获得高表达MHCⅠ分子功能的单克隆细胞株.方法:将615小鼠MHCⅠ(H-2Kk)cDNA定向连接至PLXSN逆转录病毒质粒,转染E.coli JM109,限制性酶切分析法筛选出重组质粒PLXSN-H-2Kk,继而转染PA317细胞,经G418筛选获得抗性PA317单克隆细胞株,并转染NIH3T3细胞,依抗性NIH3T3细胞克隆数目,鉴定病毒液的滴度和PA317单克隆细胞株.结果:转染成功的病毒液滴度位于1.6×104～1.1×105CFU/ml之间,PA317单克隆细胞株成片生长良好,并高表达H-2Kk产物.结论:H-2KkcDNA重组逆转录病毒质粒的成功构建、包装和滴度鉴定为在615小鼠上进行恶性肿瘤的MHC Ⅰ转基因治疗奠定了物质基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李龙江	四川大学华西口腔医学院	159	1072	14.0	25.0
2	彭文珍	四川大学华西基础医学与法医学院分子生物学开放实验室	15	116	4.0	10.0
3	温玉明	四川大学华西口腔医学院	140	1373	17.0	30.0
4	王昌美	四川大学华西口腔医学院	74	938	15.0	27.0
5	龚浩	四川大学华西口腔医学院	7	42	3.0	6.0
6	陈俊杰	四川大学华西基础医学与法医学院分子生物学开放实验室	51	132	6.0	8.0