小鼠胚胎成纤维细胞的分离、扩增和抑制

• 作者: 刘民 李柏青
• 来源期刊: 中国实验动物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠 胚胎 成纤维细胞 胚胎干细胞
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 215-219
• 页数: 5页
• 分类号: Q952
• 字数: 4357字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7856.2002.04.007

摘要

目的建立有效的胚胎成纤维细胞饲养层体系,用于分离和克隆胚胎干细胞研究.方法取胎鼠组织制备小鼠原代成纤维细胞,观察不同分离和培养条件对细胞增殖的影响,以及丝裂霉素C对细胞增殖的抑制作用;细胞增殖的数量用MTT法测定.结果分离小鼠胚胎原代成纤维细胞的最适胎龄是12.5～14.5 d;20℃～25℃时,用0.25%胰蛋白酶消化组织的最佳时间为3 mi n;可在培养3～6 d后进行传代.细胞冻存于-80℃3～4个月,复苏后能正常传代.丝裂霉素C 抑制胚胎成纤维细胞增殖的合适浓度为每毫升20 μg/105细胞,作用2～4 h,可维持小鼠原代胚胎成纤维细胞9 d内不增殖也不死亡.结论在合适条件下,小鼠原代胚胎成纤维细胞能顺利分离和培养,并能多次传代和冻存;经丝裂霉素C处理后增殖受抑制,可作为饲养层细胞用于胚胎干细胞的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李柏青		100	506	11.0	16.0
2	刘民		8	64	3.0	8.0