体外筛选炭疽芽孢适配子

• 作者: 俞守义 宋亚军 张敏丽 杨瑞馥 王津 甄蓓 郭兆彪
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SELEX 炭疽芽孢 适配子 亲和性 混合夹心法
• 年，卷（期）: 2002,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 635-642
• 页数: 8页
• 分类号: Q93
• 语种: 英文

摘要

用SELEX技术, 寻获炭疽芽孢适配子, 研究其亲和功能及是否作为炭疽芽孢的检测分子. 化学合成长度为35 mer的随机DNA库, 以炭疽杆菌疫苗株A.16R芽孢为靶标进行18轮的筛选, 筛选产物克隆、测序, 利用生物素-亲和素-辣根过氧化物酶显色系统判断适配子与芽孢的结合活性; 计算机软件分析测序适配子保守序列和二级结构; 以兔抗炭疽芽孢抗体为捕获分子, 适配子为检测分子混合夹心法检测炭疽芽孢. 第18轮筛选的适配子与芽孢结合后A值比第1轮的提高了3733.33%以上; 测序79个序列中, A值最高为1.20, 最低为0.20; 混合夹心法检测表明, 适配子量为16 μg, 芽孢为4×107个时, 显色信号强度最强. 结果提示, 其5′端茎环及发夹结构是与芽孢结合的基础, 远程高级结构对其结合功能有一定的影响; 寡核苷酸适配子可以作为炭疽芽孢的检测分子.