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摘要:
目的分析SD序列长度、基因起始码ATG和终止码TAA上下游处RNA的二级结构及密码子偏性等影响表达效率的主要因素,以期实现重组人干细胞因子在原核细菌中高效表达.方法分析并修改编码人SCF氨基酸的密码子,分段合成改造后的基因,PCR一次性完成拼接,将基因克隆到pBV-220载体上,诱导表达.结果天然人SCF基因在pBV-220载体的表达占菌体总蛋白的9.5%,基因改造后SCF占菌体总蛋白的27%,表达的蛋白能够为SCF的单克隆抗体所识别,初步纯化的sCF蛋白纯度大于80%,能够促进Mo7e细胞的增殖活性.结论密码子偏性是影响SCF在原核细菌中高效表达的主要因素,通过改变密码子偏性能过实现高效表达.
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文献信息
篇名 影响人干细胞因子基因高效表达的因素探讨
来源期刊 免疫学杂志 学科 生物学
关键词 pBV-220 RNA二级结构 蛋白表达 全基因合成
年,卷(期) 2002,(3) 所属期刊栏目 技术与方法
研究方向 页码范围 225-228
页数 4页 分类号 Q75|Q812
字数 3162字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1000-8861.2002.03.019
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 戚中田 第二军医大学微生物学教研室 159 632 13.0 16.0
2 沈倍奋 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室 213 1497 18.0 31.0
3 冯健男 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室 50 151 7.0 8.0
4 王建安 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室 18 112 5.0 10.0
5 赖春宁 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室 16 233 5.0 15.0
6 洪海燕 第二军医大学微生物学教研室 5 25 3.0 5.0
7 刘涛 军事医学科学院基础医学研究所分子免疫室 8 66 3.0 8.0
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研究主题发展历程
节点文献
pBV-220
RNA二级结构
蛋白表达
全基因合成
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
免疫学杂志
月刊
1000-8861
51-1332/R
大16开
重庆市沙坪坝区高滩岩
78-32
1985
chi
出版文献量(篇)
4652
总下载数(次)
25
总被引数(次)
27928
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