人干细胞因子在大肠杆菌中的表达研究

• 作者: 张劲秋 梁植权 毛华 狄旭 赵峻 陈卫东 陈松森
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 重组人SCF 高效稳定表达 SD序列
• 年，卷（期）: 1998,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 279-284
• 页数: 6页
• 分类号: Q75|Q784
• 语种: 中文

摘要

目的经过改造重组人干细胞因子(human stem cell factor,hSCF),提高其表达量.方法应用人工合成寡核苷酸引物及PCR技术,改变人干细胞因子hSCF cDNA起始密码子ATG与SD序列之间的距离及在翻译起始区(即N端氨基酸)部分采用大肠杆菌(E.coli)喜用型密码子的策略,使重组表达质粒pBV220-hSCF在E.coli中获得高效稳定表达.结果DNA序列测定证明基因的阅读框架完全正确.重组人干细胞因子的表达量从改造前占E.coli总蛋白的12%提高到40%左右.纯化的重组hSCF N端17个氨基酸测序结果表明,除第一个氨基酸为甲硫氨酸外,其余与天然hSCF序列完全一致.纯化的重组hSCF经Western blot证明,与标准hSCF一致.结论提示hSCF cDNA的5′侧翼区结构对其基因表达有显著的影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈松森	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	21	92	6.0	8.0
2	狄旭	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	3	19	3.0	3.0
3	赵峻	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	72	622	14.0	22.0
4	毛华	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	1	4	1.0	1.0
5	张劲秋	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	2	9	2.0	2.0
6	陈卫东	中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所	1	4	1.0	1.0
7	梁植权	中国医学科学院中国协和医科大学	9	51	4.0	7.0