改进的PCR法克隆带小棒链霉菌cefD基因

• 作者: 张惠展 张虹 蒋亚琴
• 来源期刊: 华东理工大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 带小棒链霉菌 PCR cefD 有机辅剂 退火温度
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 页码范围: 252-255
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 2424字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3080.2002.03.009

摘要

以GC含量高达74%的带小棒链霉菌(S.clavuligerus)染色体DNA为模板,从引物设计、退火温度、有机辅剂及DNA聚合酶等方面改善PCR反应体系和扩增条件,成功地克隆得到了异青霉素异构酶的cefD基因.改进后的PCR体系中φDMSO=0.05并加入适量的Taq DNA聚合酶,退火温度比常规选择高一些,从而克服了常规PCR法扩增链霉菌基因遇到的二级结构复杂、引物与模板难以配对及引物间和引物内部易形成碱基配对等问题.改进后的PCR法提高了链霉菌基因克隆的效率,也可以广泛应用于高GC含量目的基因的快速扩增.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张惠展	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	65	477	9.0	20.0
2	张虹	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	3	44	3.0	3.0
3	蒋亚琴	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	4	1.0	1.0