应用显微切割-cDNA PCR-SSH法克隆胃癌前病变相关基因

• 作者: 孙开来 孙秀菊 徐惠绵 王梅先 贺光 郑志红 郝冬梅 马鸣超
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 显微切割 cDNA-PCR 抑制性消减杂交 异型增生
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 573-576
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 语种: 中文

摘要

目的构建胃异型增生组织cDNA消减文库,初步筛选差异表达基因.方法手工显微切割取胃异型增生和正常组织,应用cDNA PCR方法对少量组织全转录组扩增后进行双向抑制性消减杂交(suppression subtractivehvbrdization,SSH),消减后片段与载体连接、克隆、筛选、测序及同源性检索,并用斑点杂交方法验证检测结果.结果正常和异型增生组织互为tester和driver成功构建了2个cDNA消减文库,分别代表在异型增生组织中表达上调和下调基因,测序的26个克隆中15个为已知基因,3个为已知EST,8个为新的EST,GenBank登录号为BQ164614～BQ164616,BQ291516～BQ291520,其中15个片段经证实在胃异型增生阶段有显著表达差异.结论利用本室创建的显微切割-cDNA PCR-SSH法成功构建胃异型增生组织cDNA消减文库,初步筛选部分基因,为寻找胃癌发生相关基因提供重要线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐惠绵	中国医科大学医学遗传学教研室	282	1908	20.0	30.0
2	郑志红	中国医科大学医学遗传学教研室	57	222	8.0	13.0
3	孙秀菊	中国医科大学医学遗传学教研室	20	192	8.0	13.0
4	孙开来	中国医科大学医学遗传学教研室	125	811	14.0	20.0
5	郝冬梅	中国医科大学医学遗传学教研室	6	65	5.0	6.0
6	马鸣超	中国医科大学医学遗传学教研室	2	41	2.0	2.0
7	王梅先	中国医科大学医学遗传学教研室	10	120	6.0	10.0
8	贺光	中国医科大学医学遗传学教研室	10	103	5.0	10.0