bax嵌合基因克隆及其在人舌癌细胞的表达

• 作者: 彭文珍 杨绍华 王若菡 陈俊杰 马英红 高家让
• 来源期刊: 中国癌症杂志
• 学科: 医学
• 关键词: bax基因 人胶原基因调节元件 报告基因CAT 人舌鳞癌细胞
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|R739.86
• 字数: 2771字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3639.2002.01.001

摘要

目的:构建能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白的bax嵌合基因.方法:将RT-PCR获得bax基因编码序列克隆至原核表达载体pGEX-5T,再将bax cDNA 插入人α1(Ⅰ)胶原基因顺式作用元件(CIP)与报告基因CAT之间,构成 pSV-CIP-bax-CAT嵌合基因;用阳离子脂质体DOSPER将此嵌合基因转染至人舌鳞癌细胞Tca8113;用免疫狭缝印迹和ELISA方法分析报告基因CAT和目的基因bax在细胞中的表达.结果: bax基因编码序列及嵌合基因限制性酶谱正确;CAT表达的ELISA检测证实,转染是成功的,且CIP在Tca8113细胞中有促进其下游基因表达的作用(为对照组的15倍);免疫狭缝印迹和ELISA证实,转染细胞能高效表达Bax蛋白(为对照组的8倍).结论:bax嵌合基因 pSV-CIP-bax-CAT能在人舌癌细胞中高效表达Bax蛋白,为进一步研究bax基因对舌癌细胞生长与凋亡的影响奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭文珍	四川大学华西医学中心生物化学与分子生物学研究所	15	116	4.0	10.0
2	陈俊杰	四川大学华西医学中心生物化学与分子生物学研究所	51	132	6.0	8.0
3	王若菡	四川大学华西医学中心生物化学与分子生物学研究所	11	32	3.0	5.0
4	马英红	四川大学华西医学中心生物化学与分子生物学研究所	1	0	0.0	0.0
5	高家让	四川大学华西医学中心口腔医学院	2	2	1.0	1.0
6	杨绍华	四川大学华西医学中心生物化学与分子生物学研究所	1	0	0.0	0.0