AP1反应元件的确定及在细胞角蛋白13基因表达调控中的作用

• 作者: 林功标 王承龙 田勇泉 肖健云 赵素萍 邱元正
• 来源期刊: 中华医学遗传学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细胞角蛋白13基因 AP1反应元件 基因表达调控
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 479-483
• 页数: 5页
• 分类号: R394
• 字数: 4029字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1003-9406.2002.06.007

摘要

目的确定细胞角蛋白13(cytokeratin 13, CK13)基因5′旁侧-nt.199～-nt.192碱基CTGAATCA反应元件的类型及其在CK13基因表达调控中的作用.方法采用报告基因分析的方法,构建CK13基因5′旁侧513 bp全片段、-nt.207～+nt.63与氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体,并采用PCR定点诱变技术,构建与-nt.207～+nt.63同样长短,但-nt.198和-nt.197的T、G分别定点诱变为A、T的氯霉素乙酰转移酶报告基因增强子载体的重组体,通过脂质体介导的转染技术导入HeLa细胞,检测各重组体报告基因的瞬间表达,确定CK13基因5′旁侧-nt.199～-nt.192碱基CTGAATCA在CK13基因表达调控中的作用;并采用凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验验证CK13基因5′旁侧中CTGAATCA反应元件的类型.结果凝胶滞留试验及竞争性凝胶滞留试验证实CK13基因5′旁侧-nt.199～-nt.192碱基CTGAATCA反应元件是AP1反应元件,它促进CK13基因的表达.结论 CK13基因5′旁侧起始密码子上游-nt.199～-nt.192的碱基CTGAATCA是AP1反应元件,而不是cAMP反应元件,它可增进CK13基因5′旁侧的转录活性.