白纹伊蚊细胞色素P450CYP6N3基因的原核表达及鉴定

• 作者: 吴瑜 周国理 王玲 葛春喜 黄炯烈
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白纹伊蚊 细胞色素P450 CYP6N3 原核表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 9-12
• 页数: 4页
• 分类号: R384.1
• 字数: 3511字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2002.02.002

摘要

目的对白纹伊蚊细胞色素P450 CYP6N3基因进行原核表达,以获得高效表达蛋白.方法根据CYP6N3基因的全长cRNA为模板进行RT-PCR.产物经T-A克隆测序鉴定后,亚克隆入原核融合表达载体pGEX-4T-1(含有编码26KDa GST的基因序列)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行原核表达.将细菌总蛋白进行SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,通过Western blot分析鉴定目的蛋白的位置,并运用核酸蛋白分析仪扫描凝胶以确定表达产物的含量.结果获得了高效表达的融合蛋白GST-CYP6N3,表达量占菌体总蛋白的37.49%.结论本实验成功地异源表达了白纹伊蚊CYP6N3基因,为体外重建细胞色素P450 CYP6N3单加氧酶系,了解CYP6N3基因结构功能关系奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛春喜	中山医科大学寄生虫学教研室	8	29	4.0	5.0
2	黄炯烈	中山医科大学寄生虫学教研室	16	128	6.0	10.0
3	吴瑜	中山医科大学寄生虫学教研室	10	40	5.0	5.0
4	王玲	中山医科大学寄生虫学教研室	13	124	5.0	11.0
5	周国理	中山医科大学寄生虫学教研室	11	88	5.0	9.0