小鼠骨髓树突状细胞pcDNA3-hCEA转染疫苗的抗瘤作用

• 作者: 张义国 杨洪艳 汤黎明 董子明 赵明耀 郑智敏 陈宁 马俊芬 黄幼田
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 树突细胞 癌胚抗原 质粒 转染
• 年，卷（期）: 2002,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1317-1323
• 页数: 7页
• 分类号: R392
• 字数: 5124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2002.11.002

摘要

目的: 将pcDNA3-hCEA转染小鼠骨髓树突状细胞(DCs),观察其诱导BALB/c小鼠对CT26(hCEA+)的抗肿瘤免疫效应. 方法:采用rmGM-CSF和rmIL-4体外诱导培养小鼠骨髓DCs;构建真核表达质粒pcDNA3-hCEA;并用lipofectamine将其转染DCs,制备DCs(pCDNA3-hCEA)疫苗;同时制备CT26(hCEA+);采用RT-PCR检测DCs(pCDNA3-hCEA)中CEA mRNA的表达,采用放射免疫法检测DCs(pCDNA3-hCEA)培养上清中CEA的含量;使用DCs(pCDNA3-hCEA)疫苗体外诱导小鼠同种异体T淋巴细胞靶向性杀伤.采用DCs(pcDNA3-hCEA)疫苗预防免疫BALB/c小鼠,观察其对于荷临界致瘤量CT26(hCEA+)小鼠的抗肿瘤效应.结果:经G418筛选,DCs(pCDNA3-hCEA)有14%的获得率;RT-PCR检测表明DCs(pCDNA3-hCEA)内CEA mRNA呈阳性表达;放射免疫法检测表明DCs(pCDNA3-hCEA)能微量表达人CEA; DCs(pCDNA3-hCEA)能够有效诱导CEA靶向免疫杀伤.DCs(pcDNA3-hCEA)疫苗延长荷CT26(hCEA+)瘤小鼠生存期1周至4周.结论:编码肿瘤抗原基因的真核表达质粒转染的树突状细胞,能够诱导较强的特异性抗肿瘤免疫效应.