猪带绦虫抗原基因TS76的克隆及原核表达

• 作者: 付玉梅 何绍江 刘世贵 卓麟 孟民杰 朱锦 李江凌 武梅 沈斌 沈翼 王克非 高荣 魏竹波 龙章富
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 猪带绦虫 抗原基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 61-65
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 4866字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2002.02.016

摘要

目的测定和分析自猪囊尾蚴表达型cDNA文库中筛选出的cDNA克隆(TS76)的序列,并进行该片段的原核表达研究.方法采用PCR扩增重组(噬菌体(TS76中的TS76 cDNA片段,亚克隆至pUC18,得到的重组子用于测序,并对测定结果进行分析及同源性比较;将TS76片段亚克隆到原核表达载体pGEX-1(T中,免疫印迹方法筛选得到能正确表达TS76片段的重组子pGTS76;制备pGTS76原核表达产物,进行浓度梯度SDS-PAGE和Western blotting分析.结果 TS76克隆含516对核苷酸,编码含83个氨基酸残基的多肽,与EMBL数据库中的猪囊虫免疫原性蛋白质mRNA有383bp的同源区域.重组质粒在大肠杆菌中表达的融合蛋白分子量为34 KD,能与抗猪囊尾蚴兔血清产生很强的免疫反应.结论分离到一个编码具较强免疫原性猪囊尾蚴抗原的基因.