ZNRD1基因的克隆及其反义核酸对胃癌耐药细胞阿霉素蓄积的影响

• 作者: 乔泰东 张宇梅 时永全 樊代明 赵燕秋 金晓航 陈宝军
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因,ZNRD1 药物耐受性 DNA,反义 胃肿瘤
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 330-332
• 页数: 3页
• 分类号: R735.2
• 字数: 2646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2002.04.020

摘要

为获得ZNRD1基因的编码区序列,构建反义真核表达载体,通过检测ZNRD1基因反义核酸转染对胃癌长春新碱耐药细胞SGC7901/VCR阿霉素(ADM)积蓄能力的影响,评价ZNRD1在抗胃癌细胞多药耐药性方面的应用前景.用PCR方法扩增目的基因序列,PCR产物经DNA序列测定证实后,采用分子克隆技术,将所获目的基因全长cDNA片段按反方向克隆入真核表达载体pcDNA3.1+的多克隆位点之间,对重组质粒进行酶切鉴定.用脂质体介导法将ZNRD1反义核酸转染SGC7901/VCR,流式细胞仪(FACS)检测SGC7901/VCR细胞内阿霉素的蓄积量.结果应用PCR反应扩增出特异性片段,经DNA序列分析,证实与文献报道的ZNRD1基因编码区序列一致;构建了反义真核表达载体pcDNA3.1-ZNRD1;转染SGC7901/VCR细胞后,可提高细胞内ADM蓄积量.ZNRD1反义核酸转染后,胃癌多药耐药细胞株SGC7901/VCR对抗肿瘤药物ADM的积蓄作用提高,提示ZNRD1反义核酸具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用.