抗人CD154单抗轻重链可变区基因克隆与序列分析

• 作者: 宁波 张志方 张春艳 李树浓 陈琼玲
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: CD40配体 可变区基因 碱基序列分析 基因克隆
• 年，卷（期）: 2002,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1381-1385
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2887字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2002.11.017

摘要

目的:克隆抗人CD154抗体轻重链可变区基因,并分析其核苷酸序列,为基因工程抗体的构建奠定基础.方法:从分泌能抑制免疫反应的抗人CD154单克隆抗体杂交瘤细胞株7E8中提取总RNA,合成cDNA第一链后,经PCR扩增获得抗人CD154单抗轻链可变区(VL)和重链可变区(VH)基因,分别克隆入pUC18载体,并进行序列分析.结果:①抗体的轻链可变区基因全长为341 bp,编码113个氨基酸,归属于Ig的Vκ2基因,氨基酸序列分析结果显示轻链可变区含有明确的4个骨架区和3个抗原决定簇互补区,在第23位和第93位氨基酸为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两个特征性氨基酸;②抗体的重链可变区基因全长为354 bp,编码118个氨基酸,归属于小鼠IgVH基因 ,D、J区基因分别属于DSP2.9和JH2,氨基酸序列分析结果显示,重链可变区含有明确的4个骨架区和3个抗原决定簇互补区,在第23和第97位氨基酸为半胱氨酸,是与抗体二硫键形成有关的两个特征性氨基酸.结论:经核苷酸序列分析证明所克隆的基因分别为抗体的轻、重链可变区基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁波	中山大学中山医学院免疫学教研室	10	30	4.0	5.0
2	李树浓	中山大学中山医学院病理生理学教研室	38	248	9.0	14.0
3	张志方	中山大学中山医学院生理学教研室	10	25	3.0	4.0
4	张春艳	中山大学中山医学院免疫学教研室	12	29	4.0	5.0
5	陈琼玲	中山大学中山医学院免疫学教研室	2	0	0.0	0.0