多重二次PCR在微量DNA标本检验中的应用

• 作者: 廖清华 张海添 曾健 李卫 林伟雄 金琪 陆云飞 陈剑锋
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 多重PCR 二次PCR DNA测序
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 799-800
• 页数: 2页
• 分类号: Q51
• 字数: 1890字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2002.06.012

摘要

目的:探讨用多重二次PCR扩增极微量DNA标本供后续SSCP和DNA测序分析.方法:对照组取微量组织提取的DNA为模板,分别用不同的4对引物各自行PCR,同一PCR反应体系里加入4对引物扩增.然后将此扩增产物稀释1 000倍为模板,再以相同引物进行第二次PCR.实验组:取微量组织提取的DNA为模板,以与对照组相同的4对引物各自进行PCR.用琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果,用DNA测序方法检测二次PCR扩增产物的特异性.结果:微量的DNA标本可同时被多对引物二次扩增.实验组与对照组比较,各自引物扩增的DNA片段在琼脂糖凝胶电泳显示区带速率相同,测序显示碱基序列相同.结论:因极微量的DNA模板不能满足多引物多次PCR时,可用多重二次PCR扩增,本方法在法医学、考古和组织活检等方面将有广阔的用途.