抗人VEGF受体Ⅱ胞外Ⅲ区单克隆抗体的制备

• 作者: 刘嘉 李容 李长辉 杨纯正 熊冬生 许元富 邵晓枫
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮细胞生长因子受体 杂交瘤 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 193-197
• 页数: 5页
• 分类号: R392.33
• 字数: 3827字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-8861.2003.03.008

摘要

目的制备人血管内皮细胞生长因子受体Ⅱ(Kinase insert domain tontaining receptor,KDR)胞外Ⅲ区的单克隆抗体(McAb),探讨其抑制VEGF诱导的体外活性.方法在大肠杆菌中表达重组KDR胞外Ⅲ区融合蛋白.融合蛋白经抗E-tag柱分离纯化后免疫Balb/c小鼠,采用传统杂交瘤技术制备抗KDR胞外Ⅲ区McAb,采用ELISA和Western免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性,并测定单克隆抗体对VEGF165刺激脐静脉内皮细胞株ECV304增殖的中和活性.结果成功筛选出一株能稳定分泌抗KDR胞外Ⅲ区单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1D3),其分泌抗体亚类为IgG1.该McAb可明显阻断VEGF165对脐静脉内皮细胞株ECV304的刺激增生作用.结论抗人血管内皮细胞生长因子受体KDR胞外Ⅲ区McAb可通过封闭KDR而抑制VEGF活性,McAb 1D3具有潜在治疗肿瘤的活性.