瞬时转染金属硫蛋白-<em>3</em>基因后人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞的蛋白质差异表达

• 作者: 周波 杨伟 纪建国 茹炳根
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 金属硫蛋白-3 细胞转染 双向电泳 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 522-528
• 页数: 7页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

金属硫蛋白-3 (MT-3), 又称神经生长抑制因子 ,主要表达于中枢神经系统. 它属于金属硫蛋白家族, 但具有几项其他家族蛋白质如MT-1/-2等所不具有的独特性质, 是一种多功能蛋白质, 可在中枢神经系统中发挥重要的神经调节和神经保护作用, 但是具体发挥机制还很不清楚. 实验以人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y为模型, 运用最近发展起来的比较蛋白质组学研究方法对MT-3基因瞬时转染引起的SH-SY5Y细胞蛋白质的整体变化进行了系统的研究. 经考马斯亮蓝染色, 结果表明, MT-3转基因后平均每块胶上可检测到约750个蛋白质点. 利用ImageMaster 2D Elite软件对胶上的蛋白质点进行半定量分析, 发现共有17个蛋白质点呈显著的变化: 和对照组比较, 在这17个点中, 有12个表达明显上调, 有5个表达水平明显下降, 实验结果具有可重复性. 结合pI值和分子量, 应用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱对这17个点进行分析, 鉴定了其中10个点, 包括类锌指蛋白, 谷氨酸转运蛋白和增强蛋白等. 这些蛋白质都可在神经系统功能的调节中发挥作用. 实验结果表明MT-3可能是通过调节和/或协同这些蛋白质来发挥它的多种功能的.