西部马脑炎病毒基因组序列的半套式RT-PCR检测

• 作者: 于曼 吕富双 杨保安 祝庆余 秦鄂德 赵月峨 邓永强
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 西部马脑炎病毒 半套式RT-PCR 基因组序列
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 7-10
• 页数: 4页
• 分类号: R373.3+1
• 字数: 2195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-5673.2003.01.003

摘要

为进一步提高RT-PCR检测西部马脑炎病毒(WEE)病毒基因组方法的敏感性,采用半套式PCR扩增病毒基因组特异序列.首先采用逆转录法将病毒基因组RNA逆转录为cDNA,然后以此cDNA为模板,进行扩增.对扩增后电泳检查无可见DNA条带的产物进行半套式PCR;与此同时对扩增的循环数、Mg++浓度和退火温度等条件进行了优化,以进一步提高扩增的特异性.结果第一轮PCR未扩出特异性片段的WEE病毒稀释度,其半套式扩增出特定大小的DNA产物;同时优化的条件提高了扩增产物的特异性.扩增产物约为190bp的单一DNA片段,其大小与预期的相一致.结果表明采用半套式RT-PCR方法检测WEE病毒的基因组序列的敏感性可提高100倍以上.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	秦鄂德		4	27	3.0	4.0
2	于曼		4	27	3.0	4.0
3	赵月峨		2	10	1.0	2.0
4	邓永强		1	0	0.0	0.0
5	杨保安		1	0	0.0	0.0
6	吕富双		1	0	0.0	0.0
7	祝庆余		1	0	0.0	0.0