层粘连蛋白特异性受体--整合素α6亚单位胞外区单克隆抗体的制备及鉴定

• 作者: 吕天敬 周柔丽 张青云
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 整合素 层粘连蛋白受体 杂交瘤 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 183-186
• 页数: 4页
• 分类号: R813.2
• 字数: 3637字
• 语种: 中文

摘要

目的:制备针对整合素α6胞外区的单克隆抗体并鉴定其生物学特异性.方法:利用整合素α6 cDNA构建可表达整合素α6胞外区的原核表达载体,在大肠杆菌中表达GST--整合素α6胞外区融合蛋白.融合蛋白经凝胶分离纯化后免疫Balb/C小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基喋呤与胸苷选择性培养.单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后,分析其亚类及进行免疫细胞化学鉴定.结果:经ELISA双筛,获得了一株能稳定分泌针对整合素α6胞外区的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类为IgG1.免疫细胞化学显示此单抗在人肝癌细胞系BEL-7402呈强阳性反应.结论:通过原核表达产物制备并纯化了针对整合素α6胞外区的单克隆抗体,对分离纯化α6亚单位、研究其生物学作用及鉴定正常和疾病状态下是否表达整合素α6及其水平具有重要意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张青云	北京大学临床肿瘤学院北京市肿瘤防治研究所免疫室	27	116	5.0	9.0
2	周柔丽	北京大学基础医学院医学细胞生物学系	18	188	7.0	13.0
3	吕天敬	北京大学基础医学院医学细胞生物学系	3	8	2.0	2.0