绿色荧光蛋白与人肾脏NaDC3融合基因的构建及其在肾小管上皮细胞中的定位

• 作者: 付博 冯哲 刘章锁 洪权 白雪源 程根阳 陈香美
• 来源期刊: 细胞生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人钠/二羧酸协同转运蛋白-3 绿色荧光蛋白 融合基因
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究工作
• 页码范围: 170-174
• 页数: 5页
• 分类号: Q5
• 字数: 3629字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7666.2003.03.012

摘要

本文采用RT-PCR方法从人的正常肾组织中扩增出hNaDC3基因全长cDNA序列,采用基因重组技术将hNaDC3基因和绿色荧光蛋白基因融合,通过真核表达质粒-脂质体介导,导入LLC-PK1细胞系,激光共聚焦显微镜动态观察GFP-hNaDC3的定位情况.结果显示pEGFP-C3空白质粒转染的LLC-PK1细胞表达了GFP,GFP在胞内分布以核浆为主,呈均匀致密的细颗粒荧光,胞核染色强,核仁荧光稀少,界线清楚.而pEGFP-C3-hNaDC3转染细胞株的绿色荧光蛋白,转染后第1天混合分布于细胞浆和细胞膜,以粗颗粒荧光为主,两者界限不清楚,胞浆中可见未染色的圆形空洞,未见胞核染色;第3天主要聚集于细胞膜,核周的胞浆中可见粗颗粒荧光物质,胞浆和胞膜界线清楚,胞核亦未见绿色荧光蛋白;第5天清晰聚集于细胞膜,细胞膜连接呈网状.因此hNaDC3蛋白在细胞质中生成后,定位于细胞膜并稳定表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈香美	解放军总医院肾科全军肾病中心暨重点实验室	221	2494	24.0	43.0
2	刘章锁	郑州大学第一附属医院肾科	260	1365	15.0	28.0
3	洪权	解放军总医院肾科全军肾病中心暨重点实验室	21	126	7.0	10.0
4	白雪源	解放军总医院肾科全军肾病中心暨重点实验室	22	106	5.0	9.0
5	冯哲	解放军总医院肾科全军肾病中心暨重点实验室	21	78	5.0	7.0
6	付博	解放军总医院肾科全军肾病中心暨重点实验室	2	13	2.0	2.0
7	程根阳	解放军总医院肾科全军肾病中心暨重点实验室	1	10	1.0	1.0