禽流感病毒A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)NA基因的克隆及其重组禽痘病毒转移载体的构建

• 作者: 乔传玲 于康震 唐秀英 孟庆文 王秀荣 田国斌 邓国华
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 禽流感病毒 神经氨酸酶基因 重组禽痘病毒
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 111-114
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65|Q78
• 字数: 2907字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2003.02.003

摘要

采用RT-PCR技术扩增了禽流感病毒A/Guangdong/3/96(H5N1)[GD3/96]神经氨酸酶(NA)基因,并将其克隆到pUC18质粒中进行测序.核苷酸序列测定结果为:NA基因全长为1 410 bp,共编码469个氨基酸.从pUCNA中切下NA基因片段,将其亚克隆到质粒pSY538的EcoR Ⅰ位点,将带有痘苗病毒启动子P11的LacZ基因平端克隆到该质粒的Sma Ⅰ位点,然后切下同时含有NA及LacZ基因的片段,再亚克隆到禽痘病毒载体pSY681的Not Ⅰ位点,经限制性内切酶分析、PCR鉴定等,证明含有禽流感病毒NA基因的重组禽痘病毒转移载体已构建成功,从而为进一步筛选表达NA蛋白的重组禽痘病毒及探讨该蛋白的免疫原性奠定了实验基础.