斯氏狸殖吸虫半胱氨酸蛋白酶基因克隆及虫体定位

• 作者: 张敬如 张艳玲 张锡林 段建华 王英 黄复生
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 斯氏狸殖吸虫 半胱氨酸蛋白酶 克隆 原位杂交
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 214-217
• 页数: 4页
• 分类号: R383.233
• 字数: 3146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7423.2003.04.006

摘要

目的克隆斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,并研究该酶在斯氏狸殖吸虫的表达部位.方法通过RT PCR方法扩增斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,TA克隆入pUCm-T载体,鉴定、测序;利用DNASIS程序推导其编码氨基酸序列,并比较分析与其相关虫种半胱氨酸蛋白酶氨基酸序列同源性.采用地高辛标记原位杂交技术检测该酶基因在斯氏狸殖吸虫成虫的表达及组织定位.结果经RT-PCR和对阳性克隆鉴定、测序后获得一cDNA序列,长495 bp;同源性分析结果显示,该序列与相关虫种的半胱氨酸蛋白酶存在较高同源性,组成半胱氨酸催化三联体的半胱氨酸、组胺酸和天冬酰胺残基高度保守.原位杂交结果显示斯氏狸殖吸虫成虫的肠管上皮呈阳性着色.结论克隆获得了斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶cDNA片段,该片段包含了与半胱氨酸蛋白酶活性和空间结构相关的重要基因位点.斯氏狸殖吸虫成虫半胱氨酸蛋白酶的表达部位主要为肠营上皮.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄复生	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	91	437	10.0	17.0
2	张锡林	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	117	382	10.0	12.0
3	段建华	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	63	183	7.0	10.0
4	张艳玲	第三军医大学西南医院神经内科	49	320	11.0	15.0
5	王英	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	95	401	9.0	15.0
6	张敬如	第三军医大学基础医学部病原生物学教研室	31	141	7.0	10.0