hCGβ在乳酸杆菌中的分泌性表达

• 作者: 姜红 李大金 王红梅 袁正宏
• 来源期刊: 生殖与避孕
• 学科: 医学
• 关键词: 乳酸杆菌 hCGβ 电穿孔转化
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 129-134
• 页数: 7页
• 分类号: R392.3
• 字数: 4539字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-357X.2003.03.001

摘要

目的:探索乳酸杆菌携带表达hCGβ避孕疫苗的抗生育作用.方法:用PCR从短小乳酸杆菌染色体中扩增得到S-层蛋白的信号肽序列,将其与hCGβ基因连接后克隆到乳酸杆菌整合型表达载体pIlac的lac启动子下游,得到质粒pIlac hCGβ,电穿孔转化干酪氏乳酸杆菌Lb. casei CECT5276.挑选转化后的耐药菌落,在含红霉素培养基中培养,抽提其染色体DNA,PCR及测序鉴定证实hCGβ基因整合到Lb. casei的基因组中.hCG放免检测上清及细胞裂解液中的hCGβ.结果:hCGβ基因已经整合到Lb. casei的基因组中;细菌产生的目的蛋白约有3/4分泌进入培养上清,而加入诱导剂乳糖21 h后,上清中的蛋白浓度达到峰值,为440 mIU/mL.重组菌在无选择压力条件下培养50代后仍可分泌hCGβ.结论:hCGβ在乳酸杆菌中得到了稳定的、分泌性的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜红	复旦大学上海医学院分子病毒学教育部重点实验室	55	485	10.0	21.0
2	李大金	复旦大学附属妇产科研究所生殖免疫研究室	200	1588	17.0	30.0
3	袁正宏	复旦大学上海医学院分子病毒学教育部重点实验室	32	198	8.0	13.0
4	王红梅	复旦大学附属妇产科研究所生殖免疫研究室	4	39	2.0	4.0