嵌合体SBR-CTΔA1植物表达质粒的构建

• 作者: 凌均棨 麦穗
• 来源期刊: 华西口腔医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 龋病 SBR-CTΔA1 植物表达质粒 可食用疫苗
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 270-273
• 页数: 4页
• 分类号: R78
• 字数: 3555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-1182.2003.04.005

摘要

目的构建含编码嵌合体SBR-CTΔA1基因的植物表达质粒.方法用PCR扩增的含编码嵌合体SBR-CTΔA1基因的P2片段(3 498～5 378 bp),经TA克隆与pGEM-easy载体结合得到pTSC质粒,pTSC质粒经BamHⅠ和KpnⅠ双酶切后得到P2片段,P2片段与BamHⅠ和KpnⅠ双酶切后的植物高效表达质粒pPOKⅡ定向克隆,构建pROSC表达质粒;且将此质粒与bar基因(抗除草剂基因)连接,构建重组质粒pROSB,并经酶切电泳及DNA序列测定鉴定.结果含编码嵌合体SBR-CTΔA1基因的P2片段整合到pPOKⅡ的适当部位,插入相位正确,未改变目的基因的阅读框架;从pBARGUS分离出的bar基因整合到pROSC,构成重组质粒pROSB.结论本实验成功构建了携带编码嵌合体SBR-CTΔA1基因的植物表达质粒pROSC和pROSB.