感染性猪圆环病毒2型基因组DNA的分子克隆

• 作者: 华修国 崔立 芦银华 许立华 谈国蕾 陈德胜 陈溥言 黄伟坚
• 来源期刊: 中国病毒学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 基因组 转染
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 371-375
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 字数: 3379字
• 语种: 英文

摘要

本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组(1 768bp),克隆入pcDNA3载体的EcoRI酶切应点,获得含有PCV-2全基因组的重组质粒,命名为pcDNApcv2.将重组质粒大量扩增后,用EcoRI切出1 768bp的PCV-2全基因组,在体外用T4 DNA连接酶使其连接环化.用脂质体法将体外连接产物转染无PCV污染的PK-15细胞,经4次连续传代,用间接免疫荧光实验(IFA)及电镜观察证实已获得复制能力的PCV-2病毒.由此可见,本试验构建的环化的PCV-2全基因组DNA具有感染性.