重组人IL-6/IL-2融合蛋白的高密度发酵和纯化

• 作者: 明宇 李董 李静 蔡辉国 袁文肃 赵春华 马小彤
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 工学
• 关键词: 人IL6/IL2融合蛋白 发酵 分离纯化
• 年，卷（期）: 2003,（11）
• 所属期刊栏目: 生物与现代农业技术
• 页码范围: 27-30
• 页数: 4页
• 分类号: TQ92
• 字数: 3815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2003.11.007

摘要

克隆的IL-6/IL-2融合蛋白编码基因插入pBV220载体,转化BL21(DE3)菌株中表达.发酵过程中,30℃扩增生长6小时,42℃诱导培养4小时,控制溶解氧在30%～50%.发酵液中最终菌体密度(OD600)达29.17(相当于每升发酵液含55克湿菌体),表达的融合蛋白呈包涵体形式.表达蛋白占菌体总蛋白的30%左右.菌体经过超声破碎后反复洗涤包涵体,融合蛋白纯度达到70%,进一步用离子交换层析和凝胶过滤层析纯化使其纯度达95%以上.IL-6/2融合蛋白中的IL-6和IL-2活性分别为1×107和2×105U/mg.重组人IL-6/IL-2融合蛋白在大肠杆菌中达到了中试水平的高表达.