微板酶联夹心杂交法定量检测人IL-18 mRNA

• 作者: 吕建新 彭颖 金晶
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 酶联夹心杂交 逆转录-聚合酶链反应 白细胞介素-18
• 年，卷（期）: 2003,（7）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 499-501
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11|R446.61
• 字数: 2049字
• 语种: 中文

摘要

目的:建立一种高灵敏度、高特异性、精确、简便的微孔板酶联夹心杂交技术,定量检测人IL-18 mRNA.方法:针对人IL-18 mRNA RT-PCR产物一条链的不同区域序列设计一对特异探针,其中一条为捕获探针,5'端为氨基修饰,可以与微量DNA结合板表面的NOS基团共价结合,"竖直"地包被在微孔板内;另一条为检测探针,3'端标记生物素.提取人外周血单个核细胞中总RNA, 进行RT-PCR扩增IL-18 mRNA,产物热变性后加入已包被捕获探针的微孔板内进行杂交,再加入检测探针与已杂交的产物结合,最后经亲和素-辣根过氧化物酶(SAV-HRP)系统检测杂交信号.结果:该法检测IL-18 mRNA RT-PCR产物的灵敏度明显高于琼脂糖凝胶电泳,重复性良好,且结果数据化.结论:该方法具有操作简单、灵敏度高、特异性强等优点,适合于PCR扩增产物的定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭颖	温州医学院检验医学与公共卫生学院细胞与分子医学研究所	29	167	7.0	12.0
2	吕建新	温州医学院检验医学与公共卫生学院细胞与分子医学研究所	153	1535	21.0	32.0
3	金晶	温州医学院检验医学与公共卫生学院细胞与分子医学研究所	9	128	4.0	9.0