蛇毒类凝血酶Calobin cDNA的设计合成与克隆

• 作者: 张兆山 段海清 袁盛凌
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 蛇毒 类凝血酶 基因合成 聚合酶链式反应 序列分析
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 357-360
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 2967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2003.05.002

摘要

人工合成了朝鲜蝮蛇(Agkistrodon caliginosus)类凝血酶Calobin的编码序列.在设计引物时选择大肠杆菌和酵母菌的偏爱密码子,通过相互搭桥的方式,将全长为789 bp的编码序列分成14个片段,每个片段长度为78个碱基左右,采用"核心模板法"并加以改进,通过4次PCR延伸反应,得到了全长基因.经扩增后回收目的片段,双酶切后连接到克隆载体,将得到的转化子酶切鉴定后,任意选择6个克隆进行双向测序,得到了全序列正确的3个克隆.本工作为类凝血酶在大肠杆菌和酵母系统中的高效表达奠定了基础,也为长度为700～900bp片段的合成提供了帮助.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张兆山	军事医学科学院生物工程研究所	83	560	14.0	19.0
2	段海清	军事医学科学院生物工程研究所	13	192	9.0	13.0
3	袁盛凌	军事医学科学院生物工程研究所	12	68	5.0	8.0