随机单链DNA文库SELEX筛选寡核苷酸适配子方法的建立

• 作者: 孙红琰 彭剑淳 王全立 詹林盛 邵宁生
• 来源期刊: 生物化学与生物物理进展
• 学科: 医学
• 关键词: 随机ssDNA文库 指数富集配基的系统进化(SELEX) 寡核苷酸适配子 丙型肝炎病毒核心蛋白
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 151-155
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2003.01.029

摘要

指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一种新的组合化学技术. 体外构建了一个长度为81 nt、含有35个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库,优化了ssDNA文库扩增为双链DNA(dsDNA)文库的PCR反应条件.通过对比不对称PCR和生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA文库的效果,确定了以生物素-链亲和素磁珠分离方法制备ssDNA.由于脱氧核糖核酸的疏水性导致ssDNA文库与硝酸纤维素滤膜的结合背景过高,因此选择以微孔板为介质,分离与靶蛋白结合的适配子. 经过9轮循环筛选,随机ssDNA文库与丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(C蛋白)的结合率从0.5%上升到32.5%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵宁生	军事医学科学院基础医学研究所	79	523	11.0	20.0
2	孙红琰	军事医学科学院输血医学研究所	20	155	8.0	12.0
3	王全立	军事医学科学院输血医学研究所	126	899	16.0	25.0
4	詹林盛	军事医学科学院输血医学研究所	64	450	11.0	19.0
5	彭剑淳	军事医学科学院输血医学研究所	23	345	8.0	18.0