丙型肝炎病毒基因片段体外转录和真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 杨丽华 王鲁文 许丽萍 龚作炯
• 来源期刊: 临床内科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎病毒,丙型 载体 基因构建
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 临床基础研究
• 页码范围: 156-158
• 页数: 3页
• 分类号: R512.6
• 字数: 2554字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9057.2003.03.031

摘要

目的探讨基因免疫和基因治疗用于丙型肝炎病毒(HCV)疫苗及抗HCV感染的可行性,构建含HCV基因片段的体外转录和真核表达载体.方法从HCV慢性感染患者血清中提取总RNA后, 采用逆转录PCR 扩增出含有5'NCR和编码核心蛋白C区上游基因片段的HCV-cDNA,经Hind Ⅲ 和EcoRⅠ双酶切后,定向克隆入体外转录载体pGEM3ZF(-)和真核表达载体pBBS212中,构建成pGEM3ZF-HCV和pBBS212-HCV重组表达质粒,并经双酶切鉴定.结果用Hind Ⅲ 和EcoRⅠ双酶切鉴定证实,克隆的HCV基因片段正确插入载体pGEM3ZF(-)和pBBS212中.结论成功构建含5'NCR和部分核心C区基因的体外转录及真核表达载体,可为进一步研究HCV基因疫苗以及核酶基因治疗HCV奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王鲁文	武汉大学人民医院感染科	58	329	9.0	15.0
2	龚作炯	武汉大学人民医院感染科	169	1215	17.0	26.0
3	杨丽华	武汉大学人民医院感染科	37	341	9.0	17.0
4	许丽萍	浙江大学医学院	8	13	2.0	3.0